مجله دانشگاه علوم پزشکی بابل، جلد ۱۹، شماره ۶، صفحات ۳۵-۴۱
عنوان فارسی مطالعه بیان ژن ureI هلیکوباکترپیلوری به روش RT-PCR
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: هلیکوباکترپیلوری یک ارگانیسم مارپیچی شکل و گرم منفی بوده که عامل زخم معده است و نقش مهمی در ایجاد سرطان معده دارد. اجزای مختلف اوره آز، از عوامل مهم برای تحریک سیستم ایمنی هستند. هنوز واکسن موثری علیه این باکتری وجود ندارد و تحقیقات در زمینه یافتن واکسن، ضروری به نظر می رسد. هدف از تحقیق حاضر، ایجاد سازواره ژنی بر اساس ژن ureI و بررسی بیان آن است. مواد و روش­ها: در این مطالعه تجربی، تکثیر ژن ureI با انجام PCR روی ژنوم سویه استاندارد هلیکوباکترپیلوری تهیه شده از موسسه پاستور، صورت پذیرفت. قطعه 612 جفت بازی مربوط به ureI به روش T/A cloning در پلاسمید pTZ کلون گردید، سپس ساب کلونینگ این ژن در پلاسمید PIRES2-EGFP انجام شد. سازواره PIRES2-EGFP-ureI به روش الکتروپوریشن به سلول های جانوری CHO منتقل و بیان یوکاریوتی ژن ureI با تکنیک RT-PCR بررسی گردید. یافته­ ها: کلونینگ قطعه 612 جفت بازی ژن ureI در دو ناقل pTZ و PIRES2-EGFP با استفاده از تکنیک های PCR، هضم آنزیمی توسط SacI و EcoRI و تعیین توالی تایید گردید. پس از انجام RT-PCR روی سلول های CHO ترانسفرم شده، باند مربوط به ژن ureI تشکیل شد. نتیجه­ گیری: وکتور نوترکیب PIRES2-EGFP-ureI، قدرت بیان ژن ureI را دارد. بیان موفق این ژن در سلول های جانوری، می تواند در جهت بررسی ایمنی زایی در حیوانات آزمایشگاهی به عنوان یک واکسن نوترکیب مد نظر قرار گیرد. 
کلیدواژه‌های فارسی مقاله هلیکوباکترپیلوری، کلون سازی، ureI، الکتروپوریشن، بیان ژن
عنوان انگلیسی Study of the Expression of Helicobacter Pylori Urei Gene by RT-PCR
چکیده انگلیسی مقاله BACKGROUND AND OBJECTIVE: Helicobacter pylori is a spiral shaped and gram negative bacterium which causes peptic ulcer and has an important role in gastric carcinoma. Different components of urease are the important factor to stimulate the immune system. There is no effective vaccine against this bacteria and research on finding an effective vaccine is necessary. The aim of present study was to produce ureI gene construct and evaluation of the expression of this gene. METHODS: In this experimental study, the amplification of ureI gene was performed using PCR on standard strains of H. pylori genome that obtained from Pasteur institute. 612 bp fragment of ureI gene was cloned by T/A cloning technique into pTZ plasmid, and sub-cloning was done in PIRES2-EGFP vector. PIRES2-EGFP-ureI recombinant vector was transformed using electroporation into CHO cells and ureI gene expression was evaluated by RT-PCR. FINDINGS: Cloning of 612 bp fragment for ureI gene in pTZ and PIRES2-EGFP vectors had confirmed using PCR, digestion by SacI/EcoRI restriction enzymes and sequencing. After the RT-PCR on transformed CHO cells, the ureI gene fragment was observed. CONCLUSION: The PIRES2-EGFP-ureI recombinant vector can express the ureI gene. The successful gene expression of this target gene in animal cells can be used to evaluate the immunogenicity as a vaccine in laboratory animals. Also, this generated recombinant vector has the potential for assay as DNA vaccine in future experiments
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله مهسا فاضلی | m fazeli
department of biology, faculty of basic science, shahrekord branch, islamic azad university, shahrekord, iran
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی شهرکرد (Islamic azad university of shahrekord)

عباس دوستی | a doosti
biotechnology research center, islamic azad university, shahrekord branch, shahrekord, iran.
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد، شهرکرد، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی شهرکرد (Islamic azad university of shahrekord)

نشانی اینترنتی http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-2868-1&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/95/article-95-419389.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده ژنتیک، بیولوژی سلولی و مولکولی
نوع مقاله منتشر شده تحقیقی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات