|
|
مجله دانشگاه علوم پزشکی بابل، جلد ۷، شماره ۱، صفحات ۱۴-۲۱
|
|
|
| عنوان فارسی |
استخراج و تخلیص فریتین از بافت کبد |
|
| چکیده فارسی مقاله |
سابقه و هدف: مولکول فریتین با وزن مولکولی 450 کیلودالتون، پروتئین اصلی ذخیره کننده آهن می باشد که از 24 زیرواحد شامل زنجیره های سبک و سنگین تشکیل شده است و هر مولکول آن می تواند 4500 اتم آهن فریک را در خود ذخیره نماید. هدف این مطالعه، تعیین تخلیص فریتین با درجه خلوص بالا جهت استفاده در سیستم های تشخیصی و تحقیقاتی می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه با استفاده از حرارت دادن بافت هموژنیزه شده کبد در دمای 75 درجه سانتیگراد، رسوب دادن با سولفات آمونیوم و کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون با سفادکس G-200، فریتین از این بافت استخراج و تخلیص گردید. بمنظور افزایش درجه خلوص فریتین کروماتوگرافی چرخشی مورد استفاده قرار گرفت. پروتئین حاصل، در ژل پلی آکریلامید در مجاورت سدیم دودسیل سولفات الکتروفورز گردید (SDS-PAGE). از آزمون الایزا و رنگ آمیزی ژل با پتاسیم فری سیانید برای اطمینان از حصول فریتین و از رنگ آمیزی ژل با نیترات نقره جهت اطمینان از درجه خلوص فریتین استفاده شد. جهت تایید وجود زیرواحدهای 19 و 21 کیلودالتون، فریتین حاصله در شرایط احیا در حضور 2-مرکاپتو اتانول الکتروفورز شد. یافته ها: در این روش فریتین کاملا خالص بدست آمد و بازده این روش 100 میکروگرم فریتین به ازای هر گرم بافت تازه کبد بود. الکتروفورز فریتین در شرایط احیا در حضور 2-مرکاپتو اتانول، وجود زیرواحدهای 19 و 21 کیلودالتون را در این پروتئین تایید نمود. نتیجه گیری: روش مورد استفاده جهت استخراج و تخلیص فریتین از بافت کبد منجر به تولید فریتین با درجه خلوص بسیار بالا گردید که برای استفاده در زمینه های تشخیصی و تحقیقاتی مناسب بوده و بازده این روش نسبت به مطالعات دیگر قابل قبول می باشد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Extraction and purification of Ferritin from liver tissue |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Background and Objective: Ferritin with molecular weight of 450 kDa is the most important iron storage protein and is made of 24 subunits consisting of light and heavy chains. Each Ferritin molecule is able to store 4500 Fe3+ molecules. The aim of this study was to determine the preparation of highly pure Ferritin for usage in diagnostic and research systems. Methods: In this study, Ferritin was extracted and purified by homogenizing liver tissue, heating at 75 degrees centigrade, ammonium sulfate fractionation and gel filtration chromatography on sephadex G-200 column. The purity of Ferritin was improved by using recycling chromatography. Resulted protein was electrophoresed on polyacrylamide gel in the presence of sodium dodecylsulfate (SDS-PAGE). Existence of Ferritin was confirmed by ELISA test and potassium ferricyanide staining of gel. Silver nitrate staining of gel was used to confirm the purity of Ferritin. Electrophoresis of Ferritin under reducing conditions in presence of 2-mercapto ethanol was done to show the subunits (19 and 21 kDa) of ferritin. Findings: This purification method resulted in very pure Ferritin and the yield was 100 µg/gr of wet liver tissue. Electrophoresis of Ferritin under reducing conditions in presence of 2-mercapto ethanol showed the both subunits (19 and 21 kDa) of Ferritin. Conclusion: Highly pure Ferritin resulted by this method in appropriate for diagnostic and research purpose and the yield is reasonable comparing other studies. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
رضا بهجتی اردکانی | r behjati ardakani
تهران، بزرگراه شهید چمران، اوین، پژوهشکده ابن سینا، تلفن 2402011-021
محمدرضا صادقی | mr sadeghi
رویا قدس | r ghods
علی احمد بیات | ah bayat
محمد جدی تهرانی | m jeddi tehrani
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://www.jbums.org/browse.php?a_code=A-10-1370-288&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
بیوشیمی |
| نوع مقاله منتشر شده |
تحلیلی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|